Abstract: Ген термостабильной эстеразы бактерии Ureibacillus thermosphaericus был экспрессирован в штамме E. coli BL21(DE3) в составе генетической конструкции pET32b-estUT1, содержащей домен TrxA, под контролем Т7-промотора. Удельная активность и относительная термостабильность полученного таким образом рекомбинантного фермента увеличилась от 45,2 до 65,8 % (инкубация 1 ч при 70 °С). Обнаружено, что дополнительный домен TrxA не оказывает заметного влияния на рН оптимум активности фермента и его субстратную специфичность. В то же время отсутствие домена TrxA обусловливает значительное увеличение стабильности estUT1 в присутствии различных химических веществ, включая этанол и метанол. Максимальная каталитическая эффективность (kcat /KM) для эстеразы зарегестрирована в отсутствие домена TrxA и составила 280,0 с-1·мМ-1. Таким образом, введение дополнительного процессируемого домена TrxA, с одной стороны, позволяет секретировать фермент в растворенном виде, но, с другой, снижает термостабильность целевого белка.

Cite: Сорокина К.Н. , Самойлова Ю.В. , Пармон В.Н.
Термостабильная эстераза estUT1 бактерии Ureibacillus thermosphaericus: влияние дополнительного процессируемого домена TrxA на свойства фермента
Катализ в промышленности. 2019. Т.19. №5. С.399-407. DOI: 10.18412/1816-0387-2019-5-399-407RSCI РИНЦ ANCAN OpenAlex

Translated: Sorokina K.N. , Samoylova Y.V. , Parmon V.N.
Thermostable Esterase estUT1 from Ureibacillus thermosphaericus: Effect of TrxA Tag on the Enzyme Properties
Catalysis in Industry. 2020. V.12. N2. P.148-154. DOI: 10.1134/S2070050420020099 WOS Scopus РИНЦ OpenAlex

Dates:

Submitted:	May 6, 2019
Accepted:	Jun 24, 2019
Published online:	Sep 17, 2019

Identifiers:

RSCI:	RSCI:40636803
Elibrary:	40636803
Chemical Abstracts:	2020:932338
Chemical Abstracts (print):	173:275112
OpenAlex:	W2974343567

Citing: Пока нет цитирований

Altmetrics: